上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

    上海遠(yuǎn)慕生物科技是家專業(yè)供應(yīng)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商，提供人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)，以及酶聯(lián)免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標(biāo)檢測(cè)試劑盒，染色試劑盒，生化試劑盒，培養(yǎng)基，抗體，動(dòng)物血清，標(biāo)準(zhǔn)品，化學(xué)試劑，實(shí)驗(yàn)耗材，細(xì)胞株，其他實(shí)驗(yàn)試劑及實(shí)驗(yàn)品，ELISA種屬涵蓋了科研實(shí)驗(yàn)所需的動(dòng)植物，咨詢！

    產(chǎn)品中文名：人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒

    產(chǎn)品英文名：Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit

    規(guī)格：96T/48T

    保存：2-8℃

    貨號(hào)：YM-S0069

    使用范圍：僅供科研檢測(cè)，不得用于臨床。

    服務(wù)承諾：工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)的技術(shù)咨詢和指導(dǎo) 。我們的銷售工程師經(jīng)過(guò)專業(yè)培訓(xùn)的，將為您提供滿意的產(chǎn)品和真誠(chéng)的服務(wù)。

    特點(diǎn)：

    一、高效、靈敏、特異的抗體；

    二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；

    三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

    四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；

    五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

   人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū) 操作注意事項(xiàng)：

    試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

    實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

    不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

    使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

    使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

    洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

    底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

    加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

    按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

    人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū) 原理技術(shù)原理：

    （1）抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。

    （2）結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。

    （3）酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。

    （4）受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。

    （5）此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

    （6）加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。

    在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括：

    （1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

    （2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好，吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響，一般多采用4℃ 18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1～10μg/ml。

    （3）酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。

    （4）酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

    檢測(cè)范圍和靈敏度不同，用量少時(shí)，可使用分裝，前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。

    試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2，零孔的OD 值都控制在0.10以下。

    試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。

    試劑盒重復(fù)性好，板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。

    試劑的組份都多給20%的富余量，確保完成48/96孔的檢測(cè)，避免分次檢測(cè)可能造成試劑量不足的情況。

    檢測(cè)抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適（均為1:30）， 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性

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